Иммуноферментный анализ (или сокращенно ИФА) – это лабораторное исследование, которое помогает поставить точный диагноз, выявить скрытые болезни, определить предрасположенность к тем или иным заболеваниям, а также контролировать эффективность назначенной терапии. Во время исследования в сыворотке крови пациента выявляются антигены, характерные для конкретных возбудителей, и антитела к ним.
В чем суть
Для того чтобы понять принцип проведения ИФА, необходимо вспомнить, как работает иммунная система организма, что такое «антиген» и «антитела», и какие функции они выполняют.
Антиген – это молекула, которая несет определенную информацию о клетке. Если в организм попадает чужеродный антиген, антитела (или иммуноглобулины (Ig) в ответ на появление в организме чужеродного микроорганизма связываются с ним и опознают, свой это или чужой. При сигнале «чужой», антитела начинают уничтожать потенциально опасный объект. Такое взаимодействие «антиген-антитело» называется иммунным комплексом . На нем и основан метод ИФА.
Показания
Анализ широко применяется для диагностики различного рода заболеваний. И что особенно ценно, это исследование достаточно точно диагностирует заболевания, которые протекают в организме скрыто, без симптомов.
С его помощью можно выявить:
- инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, сифилис, герпес, ВИЧ и т.д.);
- токсоплазмоз, туберкулез, гепатиты, корь и т.д.;
- аутоиммунные проблемы;
- онкологию;
- половые гормоны;
- гормоны щитовидной железы;
- аллергию.
ИФА позволяет выявить даже маркеры заболеваний сердца. Кроме того, его назначают и для оценки эффективности проводимого курса лечения, а также перед некоторыми видами хирургических вмешательств.
Подготовка
Кровь для исследования берется из вены натощак, желательно, в утренние часы.
Накануне следует воздержаться от алкоголя, сладких напитков, кофе и обильного ужина. Кроме того, на результаты показателей может повлиять прием определенных лекарственных средств, поэтому необходима консультация с лечащим врачом.
За 4 часа до проведения необходимо исключить курение.
Иммуноферментный анализ крови в ОН КЛИНИК
Международный медицинский центр ОН КЛИНИК оснащен собственной лабораторией, имеющей международный сертификат контроля качества. Здесь опытные и квалифицированные специалисты проводят различного рода анализы (более 1000 наименований).
Среди преимуществ данного метода можно выделить то, что он уже на самых ранних этапах развития болезни выявляет ее. Чувствительность теста составляет 90%. Исследование точно показывает динамику инфекционного процесса, что позволяет специалисту отслеживать эффективность терапии. Весь процесс проведения полностью автоматизирован, что исключает влияние так называемого «человеческого фактора».
Дополнительно к тому, высокоточное оборудование позволяет получить достоверные результаты исследования в минимально короткий промежуток времени.
Расшифровать результаты Вы сможете в тот же день с врачом. На основе их врач выберет тактику лечения, которая подходит именно Вам.
ОН КЛИНИК: За более чем 25 лет работы нас выбрали миллионы людей. Присоединяйтесь!
Врачи
Администратор свяжется с Вами для подтверждения записи. ММЦ «ОН КЛИНИК» гарантирует полную конфиденциальность Вашего обращения.
Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.
Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.
ИФА анализ — это такоелабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.
Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.
ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.
Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.
Виды иммуноглобулинов
Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.
Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.
Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:
| Кол-во в организме | Функции | Период полураспада (дней) | Значение | |||||||||||||||||||||||||||
| G | 70% | Формируют пассивный иммунитет у новорожденного; необходимы для иммунного ответа улучшают фагоцитоз, | 21-24 | обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях | ||||||||||||||||||||||||||
| М | 5-10% | нужны для активации фагоцитоза, способны связать 5 молекул антигена, | 5 | Обеспечивает первичную иммунную реакцию | ||||||||||||||||||||||||||
| А | 10-15 | Нейтрализуют токсины и вирусы нужны для формирования раннего иммунитета Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A. Показания к сдаче анализа на иммуноглобулиныИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным. Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:
ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований. Подготовка к сдаче анализаПри подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил: Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок. Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается. Порядок взятия пробыВ качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови. Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.
Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала. Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С. Как делают анализПосле подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены. Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:
В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора. Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА. При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей. Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.
При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию. Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете. Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами. Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате. Когда будет готов анализПроведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий. Результаты теста и их расшифровкаНа полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител. Возможны различные интерпретации результатов:
Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:
Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:
ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом. Значение результатов тестаИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных. Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:
В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование. Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев). В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).
ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы. IgG- хроническая стадия инвазии |
||||||||||||||||||||||||||||
| IgA – заражение произошло более 30 дней назад | ||||||||||||||||||||||||||||||
| IgG – инвазия находится в острой фазе | ||||||||||||||||||||||||||||||
| IgG – подтверждает диагноз и показывает эффективность терапии |
Плюсы и минусы анализа
ИФА имеет множество достоинств, что и объясняет его популярность среди врачей и пациентов, это:
- высокая точность результата,
- доступная цена,
- быстрый результат,
- выявление стадии заболевания,
- контроль заболевания в динамике.
Однако наравне с достоинствами существует и недостаток – в редких случаях анализ бывает ложноположительным или ложноотрицательным.
Почему результат может быть недостоверным
Ошибки в результате могут возникать из-за технических нарушений, так же недостоверным анализ бывает у людей с некоторыми хроническими заболеваниями (ревматоидный фактор) для которых характерной является выработка специфических антител.
Так же на конечный результат оказывает влияние употребление пациентов медикаментов и нарушение метаболизма. По данным причинам положительный результат на ВИЧ и онкопатологии требует повторную сдачу проб.
Стоимость исследования
Цена ИФА варьируется в зависимости от направления диагностики (руб.):
- гепатит 250 -900;
- вирусы – 250 -1000;
- ВИЧ – 250-350;
- глистные инвазии – 280 — 900;
- сифилис -150-250;
- грибковые инфекции 400-500.
Оформление статьи: Лозинский Олег
Видео о ИФА анализе
Как выполняется анализ ИФА:
Содержание
Для оценки способности организма сопротивляться инфекционным болезням или для определения фазы патологии применяют анализ крови. Метод ИФА занимает важное место среди лабораторных исследований, он помогает всесторонне изучить деятельность защитной функции крови, определить иммунодефицит при инфекционных заболевания, недугах крови, гормональных, аутоиммунных процессах.
Что такое иммуноферментный анализ крови
Этот метод относится к лабораторным исследованиям, определяет наличие защитных факторов крови белковой природы (антител) к определенным болезнетворным агентам (антигенам) . Иммуноферментный анализ крови определяет иммуноглобулины, которые могут обнаруживаться в виде иммунокомплексов. Появляются они при возникновении сложных нейрогуморальных реакций иммунной защиты человека, которые становятся ответом на внедрение чужеродных антигенов.
Против каждого вида болезнетворного агента производятся в организме специфические антитела. Далее происходит связывание патологического микроорганизма или антигена, образуется комплексное соединение «антиген-антитело». Затем оно нейтрализуется, происходит ферментативный лизис, реакция фагоцитоза, и заканчивается процесс выводом из организма. Наличие конкретных комплексов, определяющееся ИФА, говорит о виде возбудителя, вредного вещества у больного.
Классы иммуноглобулинов
Учеными обнаружено и изучено 5 видов иммуноглобулинов: IgE, IgD, IgG, IgM, IgА . Существуют и другие классы, но они находятся еще на стадии исследования, и не до конца выяснена их роль. В практической медицине важное значение имеют А, М, G. Информативность, точность определения базируется на временных промежутках, за которые они появляются, достигают максимума и исчезают.
Показания к исследованию крови методом ИФА
При помощи этого анализа можно оценивать эффективность лечения, проводить комплексное исследование перед трансплантологическими операциями, определять состояние иммунодефицита и антитела к более 600 видов аллергенов . Исследование крови методом ИФА использует в качестве дополнительного способа обнаружения онкологических клеток. Назначают анализ при необходимости обнаружения антител к микробам, которые провоцируют венерические патологии:
- трихомониаз;
- сифилис;
- токсоплазмоз;
- микоплазмоз;
- уреаплазмоз.
При глистных инвазиях в анализе ИФА будет отмечен рост количества иммуноглобулинов. Проводится исследования для подтверждения наличия у больного:
- вируса Эпштейна-Барра;
- герпетических инфекций;
- цитомегаловируса;
- группы вирусных гепатитов.
Анализ крови методом ИФА
Иммуноферментное исследование крови не единственный вариант для определения иммуноглобулинов. Иногда для этого исследования делают забор спинномозговой жидкости, ткани стекловидного тела, околоплодных вод. При использовании крови набирают ее из локтевой вены при помощи инъекционной иглы. Сдавать анализ необходимо натощак, перед ИФА не рекомендуется принимать медицинские препараты, которые могут повлиять на результат. Следует отказаться от алкоголя, курения, употребления наркотических веществ перед сдачей биоматериала. Варианты результатов теста:
- При отрицательных показателях иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA, врачи говорят об отсутствии патологии или начальной стадии. Такой же результат (отрицательный) будет после полного выздоровления по прошествии длительного периода.
- Если IgG проявляется положительно, а IgM и IgA не обнаружены, это указывает на образование иммунитета после прививки или инфекционной болезни.
- При высоких титрах IgM и отрицательных IgA, IgG ставят диагноз острого инфекционного заболевания.
- При положительном показателе IgG, IgM, IgA врачи говорят об острой фазе рецидива уже имеющегося хронического недуга.
- При хронической инфекции, которая находится на стадии стихания (ремиссии), анализ ИФА показывает отрицательные титры IgM, а IgA и IgG будут положительными.
Преимущества и недостатки ИФА анализа
Основным отрицательным моментом этого исследования является вероятность получения ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Причиной недостоверности становится прием медикаментов, технические недочеты лаборатории. Фальсифицировать анализ может процесс нарушения метаболизма в организме. Главными достоинствами анализа ИФА являются:
- точность, диагностическая специфичность;
- невысокая себестоимость анализа;
- скорость получения результатов;
- возможность динамического контроля стадии патологии, эффективности лечения;
- простота исследования;
- возможность выполнять массовые обследования очагов инфекции;
- безболезненность, безопасность для больного;
- применение при обработке информационных технологий.
Видео
Нашли в тексте ошибку?
Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!
В лаборатории гемостаза МЖЦ используют новый, высокочувствительный метод ИФА - ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), гетерогенный твердофазный иммунный анализ. В ходе исследования определяют наличие антител в крови пациента к возбудителям различных болезней.
Стоимость ИФА анализа*
Для чего сдают иммуноферментный анализ
ИФА используют во многих сферах медицины. У людей с ишемической болезнью сердца, атеросклерозом и гипертонией выявляют антитела к белкам системы гемостаза - тромбину, а2 макроглобулину и антитромбину 3, а также пептидным биорегуляторам свертывающей системы - ангеотензину 2 и брадикинину.
ИФА доказал свою эффективность в пренатальной диагностике и при определении фертильности - это АФП-тест (диагностика расщелины позвоночника, трисомии у плода), тесты на стероидные гормоны эстадиол, эстриол, прогестерон.
Множественные осложнения беременности, бесплодие и тромбофлебит провоцирует тяжелое аутоиммунное заболевание - антифосфолипидный синдром. Диагностику АФС в Медицинском Женском Центре также проводят методом иммуноферментного анализа: определяют антитела к кардиолипину, b2-гликопротеину, протромбину и аннексину 5.
